1 産品介紹
基因型為(wèi)：C58 (rifR) Ti pEHA101 (pTiBo542 D T-DNA) (kanR) Nopaline。
适用于菸草、番茄、煙草等植物的轉基因操作(zuò)。
經pK7WGF2質粒（壯觀黴素抗性）檢測轉化效率高(gāo)達103cfu/μg。
2 操作(zuò)步驟：
2.1. 取-80℃保存的農杆菌感受态于室溫或手心片刻待其部分融化，處于冰水(shuǐ)混合狀态時(shí)插入 冰中。
2.2.每100 μl感受态加入0.01-1 μg質粒DNA（轉化效率較高(gāo)，第一次使用前最好做(zuò)預實驗确定所加質粒的量），用手撥打管底混勻，依次于冰上(shàng)靜置5分鍾、液氮5分鍾、37℃水(shuǐ)浴5分鍾、冰浴5分鍾。
2.3. 加入700 μl無抗生(shēng)素的LB或YEB液體(tǐ)培養基，于28℃振蕩培養2~3小(xiǎo)時(shí)。
2.4. 6000 rpm離心一分鍾收菌，留取100μl左右上(shàng)清輕輕吹打重懸菌塊塗布于含相應抗生(shēng)素的LB或YEB平闆上(shàng)，倒置放于28℃培養箱培養2-3天。
（當平闆隻含有(yǒu)轉化質粒上(shàng)的抗生(shēng)素時(shí)，28℃培養48 h即可(kě)；平闆中同時(shí)含有(yǒu)轉化質粒上(shàng)的抗生(shēng)素和(hé)20μg/ml rif 時(shí)，需28℃培養60 h；如果使用的平闆含有(yǒu)50μg/ml rif 則需要28℃培養72-90 h）。
3 注意事項：
3.1. 感受态細胞最好在冰上(shàng)融化。
3.2. 混入質粒時(shí)應輕柔操作(zuò)。
3.3. 轉化高(gāo)濃度的質粒可(kě)相應減少(shǎo)最終用于塗闆的菌量。
3.4. 利福平濃度不應高(gāo)于25 μg/ml，過高(gāo)的利福平濃度不利于農杆菌生(shēng)長，會(huì)降低(dī)其生(shēng)長速度和(hé)轉化效率。本公司感受态計(jì)算(suàn)轉化效率時(shí)所用平闆隻含有(yǒu)50 μg/ml壯觀黴素，若所用平闆含有(yǒu)20 μg/ml rif則轉化效率降低(dī)到1/2。
3.5. 培養基中加入利福平的目的是防止雜菌生(shēng)長、篩選農杆菌；根據所用菌株抗性加入Ti質粒篩選抗生(shēng)素可(kě)防止Ti質粒丢失，但(dàn)Ti質粒篩選抗生(shēng)素不利于農杆菌的轉基因操作(zuò)，所以一般培養農杆菌時(shí)不考慮這些(xiē)抗生(shēng)素，Ti質粒丢失的概率極低(dī)(可(kě)以忽略)。
基因型為(wèi)：C58 (rifR) Ti pEHA101 (pTiBo542 D T-DNA) (kanR) Nopaline。
适用于菸草、番茄、煙草等植物的轉基因操作(zuò)。
經pK7WGF2質粒（壯觀黴素抗性）檢測轉化效率高(gāo)達103cfu/μg。
2 操作(zuò)步驟：
2.1. 取-80℃保存的農杆菌感受态于室溫或手心片刻待其部分融化，處于冰水(shuǐ)混合狀态時(shí)插入 冰中。
2.2.每100 μl感受态加入0.01-1 μg質粒DNA（轉化效率較高(gāo)，第一次使用前最好做(zuò)預實驗确定所加質粒的量），用手撥打管底混勻，依次于冰上(shàng)靜置5分鍾、液氮5分鍾、37℃水(shuǐ)浴5分鍾、冰浴5分鍾。
2.3. 加入700 μl無抗生(shēng)素的LB或YEB液體(tǐ)培養基，于28℃振蕩培養2~3小(xiǎo)時(shí)。
2.4. 6000 rpm離心一分鍾收菌，留取100μl左右上(shàng)清輕輕吹打重懸菌塊塗布于含相應抗生(shēng)素的LB或YEB平闆上(shàng)，倒置放于28℃培養箱培養2-3天。
（當平闆隻含有(yǒu)轉化質粒上(shàng)的抗生(shēng)素時(shí)，28℃培養48 h即可(kě)；平闆中同時(shí)含有(yǒu)轉化質粒上(shàng)的抗生(shēng)素和(hé)20μg/ml rif 時(shí)，需28℃培養60 h；如果使用的平闆含有(yǒu)50μg/ml rif 則需要28℃培養72-90 h）。
3 注意事項：
3.1. 感受态細胞最好在冰上(shàng)融化。
3.2. 混入質粒時(shí)應輕柔操作(zuò)。
3.3. 轉化高(gāo)濃度的質粒可(kě)相應減少(shǎo)最終用于塗闆的菌量。
3.4. 利福平濃度不應高(gāo)于25 μg/ml，過高(gāo)的利福平濃度不利于農杆菌生(shēng)長，會(huì)降低(dī)其生(shēng)長速度和(hé)轉化效率。本公司感受态計(jì)算(suàn)轉化效率時(shí)所用平闆隻含有(yǒu)50 μg/ml壯觀黴素，若所用平闆含有(yǒu)20 μg/ml rif則轉化效率降低(dī)到1/2。
3.5. 培養基中加入利福平的目的是防止雜菌生(shēng)長、篩選農杆菌；根據所用菌株抗性加入Ti質粒篩選抗生(shēng)素可(kě)防止Ti質粒丢失，但(dàn)Ti質粒篩選抗生(shēng)素不利于農杆菌的轉基因操作(zuò)，所以一般培養農杆菌時(shí)不考慮這些(xiē)抗生(shēng)素，Ti質粒丢失的概率極低(dī)(可(kě)以忽略)。
COA搜索：
免責申明(míng)：
本網站(zhàn)所提供的信息，隻供參考之用。
本網站(zhàn)及其雇員一概毋須以任何方式就任何信息傳遞或傳送的失誤、不準确或錯誤對用戶或任何其他人(rén)士負任何直接或間(jiān)接的責任。
在法律允許的範圍內(nèi)，本網站(zhàn)在此聲明(míng),不承擔用戶或任何人(rén)士就使用或未能使用本網站(zhàn)所提供的信息或任何鏈接或項目所引緻的任何直接、間(jiān)接、附帶、從屬、特殊、懲罰性或懲戒性的損害賠償（包括但(dàn)不限于收益、預期利潤的損失或失去的業務、未實現預期的節省）。
本網站(zhàn)所提供的信息，若在任何司法管轄地區(qū)供任何人(rén)士使用或分發給任何人(rén)士時(shí)會(huì)違反該司法管轄地區(qū)的法律或條例的規定或會(huì)導緻本網站(zhàn)或其第三方代理(lǐ)人(rén)受限于該司法管轄地區(qū)內(nèi)的任何監管規定時(shí)，則該等信息不宜在該司法管轄地區(qū)供該等任何人(rén)士使用或分發給該等任何人(rén)士。用戶須自行(xíng)保證不會(huì)受限于任何限制(zhì)或禁止用戶使用或分發本網站(zhàn)所提供信息的當地的規定。
本網站(zhàn)圖片，文字之類版權申明(míng)，因為(wèi)網站(zhàn)可(kě)以由注冊用戶自行(xíng)上(shàng)傳圖片或文字，本網站(zhàn)無法鑒别所上(shàng)傳圖片或文字的知識版權，如果侵犯，請(qǐng)及時(shí)通(tōng)知我們，本網站(zhàn)将在第一時(shí)間(jiān)及時(shí)删除。
凡以任何方式登錄本網站(zhàn)或直接、間(jiān)接使用本網站(zhàn)資料者，視(shì)為(wèi)自願接受本網站(zhàn)聲明(míng)的約束。
通(tōng)用銷售條款
一． 買方對産品的使用：産品應當用于實驗室研究目的，不可(kě)用作(zuò)其他用途（包括但(dàn)不限于：體(tǐ)外診斷、食品、藥物、醫(yī)療器(qì)械、人(rén)用或獸用治療、化妝品或其他商業用途）。購買方應明(míng)确清楚知道(dào)此聲明(míng)，并嚴格遵守。如有(yǒu)任何因購買方隐瞞真實購買意圖，由此引起的法律責任以及一切法律後果，由購買方承擔。
二． 準确訂貨：下訂單時(shí)，買方應預先仔細審閱産品的技(jì)術(shù)指标，确認無誤。不詳之處應立即查詢。訂單及産品一經發出，即視(shì)為(wèi)買方認可(kě)有(yǒu)關産品的技(jì)術(shù)指标。
三． 質量責任：我司保證所供産品質量與随貨COA所列标準相符。買方應以産品制(zhì)造商的标準作(zuò)為(wèi)驗收标準。鑒于化學品的特殊性，賣方對未使用之前的産品質量負責，對化學品的應用不負有(yǒu)任何直接與間(jiān)接的責任。賣方提醒買方：在做(zuò)實驗之前，預先按照技(jì)術(shù)規範檢驗産品質量。在産品開(kāi)始使用之後，買方對應用及其結果負有(yǒu)全部責任。若有(yǒu)質量異議，買方需在收到貨物後10個(gè)工作(zuò)日內(nèi)書(shū)面通(tōng)知賣方，過期無效。
四． 有(yǒu)限保證：在适用法律允許的最大(dà)限度內(nèi)，賣方提供的産品均“按現狀條件”提供給買方，賣方不作(zuò)對産品和(hé)/或其使用的各種明(míng)示或默示的保證（包括但(dàn)不限于對适銷性、适合用于特殊用途及不侵權的所有(yǒu)明(míng)示或默示保證）或賣方産品會(huì)達到任何特定結果或不會(huì)被中斷或不會(huì)有(yǒu)錯誤的保證。
五． 責任限制(zhì)：在适用法律允許的最大(dà)限度內(nèi)，賣方不對以任何方式由本合同、賣方産品或使用賣方産品引起的或與此有(yǒu)關的任何利潤或收入損失或其他後果性損失、随附性損失、特殊損失、懲罰性損失或任何其他間(jiān)接損失或損害承擔責任。在适用法律允許的最大(dà)限度內(nèi)，賣方的最高(gāo)賠償限額為(wèi)買方就所涉及的賣方産品實際支付給賣方的價格。
六． 如賣方因不可(kě)抗拒力原因無法供貨，賣方将及時(shí)通(tōng)知買方，雙方将視(shì)情況決定部分不履行(xíng)、全部不履行(xíng)或延期履行(xíng)；如供貨期限屆滿日為(wèi)國內(nèi)外重大(dà)節日或國家(jiā)法定假日，則供貨期限順延；若因缺貨導緻延期交貨或無法供貨，賣方将及時(shí)告知買方，并不視(shì)為(wèi)賣方違約。不可(kě)抗力：因火(huǒ)災、洪水(shuǐ)、風暴、爆炸、恐怖事件、戰争、政府行(xíng)為(wèi)或任何其他賣方無法預見、無法避免和(hé)無法克服的事件造成延期交貨或無法交貨的，賣方不承擔任何責任。
訂購方式：
（1）直接注冊www.ruichubio.com網站(zhàn)會(huì)員後直接在線訂購支持支付寶、微信和(hé)公務卡支付；
（2）撥打021-59145618訂購熱線訂購;
（3）登錄www.ruichubio.com下載中心下載訂購單發送至：order@ruichubio.com訂購
注：在郵件确認合同或訂購單情況下，可(kě)以貨物和(hé)發票(piào)一起寄送，對公轉賬。
發票(piào)：
本公司出具增值稅普通(tōng)發票(piào)和(hé)增值稅專用發票(piào)，适合您報銷。發票(piào)面額為(wèi)含稅後的貨物價格和(hé)運費，請(qǐng)您放心購買，我們會(huì)将運費開(kāi)進發票(piào)裏。請(qǐng)在拍下時(shí)在備注一欄裏寫上(shàng)發票(piào)擡頭。
支付：
開(kāi)票(piào)賬戶：
公司名稱 上海晨栀生物科技有限公司
電(diàn)話(huà) 021-60543596
納稅人(rén)識别号 91310116057685530X
開(kāi)戶銀行(xíng)全稱 中國銀行(xíng)股份有(yǒu)限公司上(shàng)海市長甯支行(xíng)
帳号 454663168779
支付寶轉賬請(qǐng)支付到如下賬戶
帳 戶 名 上海晨栀生物科技有限公司
賬 号 epay@ruichubio.com
為(wèi)了方便高(gāo)校(xiào)科研單位公務卡結算(suàn)，本網站(zhàn)開(kāi)通(tōng)了公務卡支付。可(kě)以在線下單選擇支付寶付款，登錄支付寶賬号添加銀行(xíng)卡（輸入公務卡号就可(kě)以）（公務卡一般就是信用卡,請(qǐng)按信用卡支付方式支付)。
運輸：
（1）生(shēng)物試劑需要冷凍運輸，運輸需要泡沫盒和(hé)一定量的冰袋（特殊商品需要幹冰），運費金額會(huì)開(kāi)進發票(piào)裏。運費以顯示為(wèi)準
（2）常規試劑采用快遞，運費以顯示為(wèi)準。
（3）大(dà)物件一般默認發德邦物流，運費需聯系客服計(jì)算(suàn)。
本網站(zhàn)所提供的信息，隻供參考之用。
本網站(zhàn)及其雇員一概毋須以任何方式就任何信息傳遞或傳送的失誤、不準确或錯誤對用戶或任何其他人(rén)士負任何直接或間(jiān)接的責任。
在法律允許的範圍內(nèi)，本網站(zhàn)在此聲明(míng),不承擔用戶或任何人(rén)士就使用或未能使用本網站(zhàn)所提供的信息或任何鏈接或項目所引緻的任何直接、間(jiān)接、附帶、從屬、特殊、懲罰性或懲戒性的損害賠償（包括但(dàn)不限于收益、預期利潤的損失或失去的業務、未實現預期的節省）。
本網站(zhàn)所提供的信息，若在任何司法管轄地區(qū)供任何人(rén)士使用或分發給任何人(rén)士時(shí)會(huì)違反該司法管轄地區(qū)的法律或條例的規定或會(huì)導緻本網站(zhàn)或其第三方代理(lǐ)人(rén)受限于該司法管轄地區(qū)內(nèi)的任何監管規定時(shí)，則該等信息不宜在該司法管轄地區(qū)供該等任何人(rén)士使用或分發給該等任何人(rén)士。用戶須自行(xíng)保證不會(huì)受限于任何限制(zhì)或禁止用戶使用或分發本網站(zhàn)所提供信息的當地的規定。
本網站(zhàn)圖片，文字之類版權申明(míng)，因為(wèi)網站(zhàn)可(kě)以由注冊用戶自行(xíng)上(shàng)傳圖片或文字，本網站(zhàn)無法鑒别所上(shàng)傳圖片或文字的知識版權，如果侵犯，請(qǐng)及時(shí)通(tōng)知我們，本網站(zhàn)将在第一時(shí)間(jiān)及時(shí)删除。
凡以任何方式登錄本網站(zhàn)或直接、間(jiān)接使用本網站(zhàn)資料者，視(shì)為(wèi)自願接受本網站(zhàn)聲明(míng)的約束。
通(tōng)用銷售條款
一． 買方對産品的使用：産品應當用于實驗室研究目的，不可(kě)用作(zuò)其他用途（包括但(dàn)不限于：體(tǐ)外診斷、食品、藥物、醫(yī)療器(qì)械、人(rén)用或獸用治療、化妝品或其他商業用途）。購買方應明(míng)确清楚知道(dào)此聲明(míng)，并嚴格遵守。如有(yǒu)任何因購買方隐瞞真實購買意圖，由此引起的法律責任以及一切法律後果，由購買方承擔。
二． 準确訂貨：下訂單時(shí)，買方應預先仔細審閱産品的技(jì)術(shù)指标，确認無誤。不詳之處應立即查詢。訂單及産品一經發出，即視(shì)為(wèi)買方認可(kě)有(yǒu)關産品的技(jì)術(shù)指标。
三． 質量責任：我司保證所供産品質量與随貨COA所列标準相符。買方應以産品制(zhì)造商的标準作(zuò)為(wèi)驗收标準。鑒于化學品的特殊性，賣方對未使用之前的産品質量負責，對化學品的應用不負有(yǒu)任何直接與間(jiān)接的責任。賣方提醒買方：在做(zuò)實驗之前，預先按照技(jì)術(shù)規範檢驗産品質量。在産品開(kāi)始使用之後，買方對應用及其結果負有(yǒu)全部責任。若有(yǒu)質量異議，買方需在收到貨物後10個(gè)工作(zuò)日內(nèi)書(shū)面通(tōng)知賣方，過期無效。
四． 有(yǒu)限保證：在适用法律允許的最大(dà)限度內(nèi)，賣方提供的産品均“按現狀條件”提供給買方，賣方不作(zuò)對産品和(hé)/或其使用的各種明(míng)示或默示的保證（包括但(dàn)不限于對适銷性、适合用于特殊用途及不侵權的所有(yǒu)明(míng)示或默示保證）或賣方産品會(huì)達到任何特定結果或不會(huì)被中斷或不會(huì)有(yǒu)錯誤的保證。
五． 責任限制(zhì)：在适用法律允許的最大(dà)限度內(nèi)，賣方不對以任何方式由本合同、賣方産品或使用賣方産品引起的或與此有(yǒu)關的任何利潤或收入損失或其他後果性損失、随附性損失、特殊損失、懲罰性損失或任何其他間(jiān)接損失或損害承擔責任。在适用法律允許的最大(dà)限度內(nèi)，賣方的最高(gāo)賠償限額為(wèi)買方就所涉及的賣方産品實際支付給賣方的價格。
六． 如賣方因不可(kě)抗拒力原因無法供貨，賣方将及時(shí)通(tōng)知買方，雙方将視(shì)情況決定部分不履行(xíng)、全部不履行(xíng)或延期履行(xíng)；如供貨期限屆滿日為(wèi)國內(nèi)外重大(dà)節日或國家(jiā)法定假日，則供貨期限順延；若因缺貨導緻延期交貨或無法供貨，賣方将及時(shí)告知買方，并不視(shì)為(wèi)賣方違約。不可(kě)抗力：因火(huǒ)災、洪水(shuǐ)、風暴、爆炸、恐怖事件、戰争、政府行(xíng)為(wèi)或任何其他賣方無法預見、無法避免和(hé)無法克服的事件造成延期交貨或無法交貨的，賣方不承擔任何責任。
訂購方式：
（1）直接注冊www.ruichubio.com網站(zhàn)會(huì)員後直接在線訂購支持支付寶、微信和(hé)公務卡支付；
（2）撥打021-59145618訂購熱線訂購;
（3）登錄www.ruichubio.com下載中心下載訂購單發送至：order@ruichubio.com訂購
注：在郵件确認合同或訂購單情況下，可(kě)以貨物和(hé)發票(piào)一起寄送，對公轉賬。
發票(piào)：
本公司出具增值稅普通(tōng)發票(piào)和(hé)增值稅專用發票(piào)，适合您報銷。發票(piào)面額為(wèi)含稅後的貨物價格和(hé)運費，請(qǐng)您放心購買，我們會(huì)将運費開(kāi)進發票(piào)裏。請(qǐng)在拍下時(shí)在備注一欄裏寫上(shàng)發票(piào)擡頭。
支付：
開(kāi)票(piào)賬戶：
公司名稱 上海晨栀生物科技有限公司
電(diàn)話(huà) 021-60543596
納稅人(rén)識别号 91310116057685530X
開(kāi)戶銀行(xíng)全稱 中國銀行(xíng)股份有(yǒu)限公司上(shàng)海市長甯支行(xíng)
帳号 454663168779
帳 戶 名 上海晨栀生物科技有限公司
賬 号 epay@ruichubio.com
為(wèi)了方便高(gāo)校(xiào)科研單位公務卡結算(suàn)，本網站(zhàn)開(kāi)通(tōng)了公務卡支付。可(kě)以在線下單選擇支付寶付款，登錄支付寶賬号添加銀行(xíng)卡（輸入公務卡号就可(kě)以）（公務卡一般就是信用卡,請(qǐng)按信用卡支付方式支付)。
運輸：
（1）生(shēng)物試劑需要冷凍運輸，運輸需要泡沫盒和(hé)一定量的冰袋（特殊商品需要幹冰），運費金額會(huì)開(kāi)進發票(piào)裏。運費以顯示為(wèi)準
（2）常規試劑采用快遞，運費以顯示為(wèi)準。
（3）大(dà)物件一般默認發德邦物流，運費需聯系客服計(jì)算(suàn)。
.png)