NHS 活化瓊脂糖說明(míng)書(shū)
分子的親和(hé)純化提供了有(yǒu)價值的方法。活化的（sefinose）瓊脂糖含有(yǒu)能夠與蛋白質或其他分子上(shàng)的伯胺
反應形成穩定的酰胺鍵的 N-羟基琥珀酰亞胺（NHS）官能團。耦合反應在 pH 7~9 的無胺緩沖液中進
行(xíng)。不管配體(tǐ)的分子量或等電(diàn)點（PI）耦合反應的效率均大(dà)于 80%。一旦配體(tǐ)被固定，所制(zhì)備的樹(shù)脂即
可(kě)以被應用到多(duō)重親和(hé)純化程序中。交聯的串珠塞糖具有(yǒu)快速的線性流動電(diàn)位，使其可(kě)用于重力流和(hé)中低(dī)
壓應用中。
4%
● 粒徑範圍
45-165μm
● 功能基團
Ni2+
● 結合載量
大(dà)于10 mg IgG/ml 基質
● 存放條件
4-10℃
● 運輸與儲存溶液
異丙醇
3 蛋白配體(tǐ)固定過程
Buffer 的準備
所有(yǒu)的水(shuǐ)和(hé)緩沖液均用 0.22 μm 或 0.45 μm 的濾膜進行(xíng)過濾。
所需附加材料
1. 空(kōng)柱以及兼容的離心機/收集管。
2. 洗滌液：1 mM 鹽酸。
3. 偶聯液：0.2 M NaHCO3，0.5 M NaCl，pH 8.0 或其他無胺緩沖液。
4. 洗滌液 1：0.1 M 乙酸-乙酸鈉，0.5 M NaCl，pH 3.0。
5. 洗滌液 2：0.1 M Tris-HCl，0.5 M NaCl，pH 8.0。
6. 保護液：包含 20%乙醇的 1* PBS。
7. 含氨基的蛋白或者多(duō)肽：在 2~3 ml 偶聯液中溶解 1~20 mg 蛋白或 1~2 mg 多(duō)肽。對于已經在溶液
中的蛋白質，在耦聯液中稀釋 4 倍，或将脫鹽/透析稀釋到偶聯液中。徹底清除含有(yǒu)伯胺的緩沖液
（如 Tris 或甘氨酸）。
8. 封閉液：0.5 M 乙醇胺，0.5 M NaCl，pH 8.3 或 0.1 M Tris-HCl，pH 8.5。
抗原偶聯過程
颠倒混勻瓊脂糖凝膠幾次。
1、垂直放置含有(yǒu) NHS 活化樹(shù)脂的柱子，平衡柱至室溫，使樹(shù)脂沉降。用洗滌液通(tōng)過抽濾洗滌三次，再
用耦合緩沖液洗滌一次。
2、添加溶解好的蛋白樣品到清洗完畢的 NHS 活化的瓊脂糖中（NHS 活化瓊脂糖 4 FF 體(tǐ)積：樣品溶液體(tǐ)積=1：1~2）。
3、混合震蕩反應在 28℃進行(xíng) 2~4 h，或者 4℃過夜。
4、收集耦合樣品，以便檢測耦合效率。填料用去離子水(shuǐ)進行(xíng)洗滌。加入兩倍柱體(tǐ)積的封閉液于28℃震
蕩反應 1 h。
5、流幹封閉液并去除，加入三倍柱體(tǐ)積的去離子水(shuǐ)洗滌樹(shù)脂。樹(shù)脂洗滌分别通(tōng)過洗滌液 1、去離子水(shuǐ)、
洗滌液 2、去離子水(shuǐ)按順序重複洗滌兩次， 然後加入相同體(tǐ)積的保護緩沖液，于 2~8℃儲存。
- 簡介
分子的親和(hé)純化提供了有(yǒu)價值的方法。活化的（sefinose）瓊脂糖含有(yǒu)能夠與蛋白質或其他分子上(shàng)的伯胺
反應形成穩定的酰胺鍵的 N-羟基琥珀酰亞胺（NHS）官能團。耦合反應在 pH 7~9 的無胺緩沖液中進
行(xíng)。不管配體(tǐ)的分子量或等電(diàn)點（PI）耦合反應的效率均大(dà)于 80%。一旦配體(tǐ)被固定，所制(zhì)備的樹(shù)脂即
可(kě)以被應用到多(duō)重親和(hé)純化程序中。交聯的串珠塞糖具有(yǒu)快速的線性流動電(diàn)位，使其可(kě)用于重力流和(hé)中低(dī)
壓應用中。
- 介質性質
4%
● 粒徑範圍
45-165μm
● 功能基團
Ni2+
● 結合載量
大(dà)于10 mg IgG/ml 基質
● 存放條件
4-10℃
● 運輸與儲存溶液
異丙醇
3 蛋白配體(tǐ)固定過程
Buffer 的準備
所有(yǒu)的水(shuǐ)和(hé)緩沖液均用 0.22 μm 或 0.45 μm 的濾膜進行(xíng)過濾。
所需附加材料
1. 空(kōng)柱以及兼容的離心機/收集管。
2. 洗滌液：1 mM 鹽酸。
3. 偶聯液：0.2 M NaHCO3，0.5 M NaCl，pH 8.0 或其他無胺緩沖液。
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4. 洗滌液 1：0.1 M 乙酸-乙酸鈉，0.5 M NaCl，pH 3.0。
5. 洗滌液 2：0.1 M Tris-HCl，0.5 M NaCl，pH 8.0。
6. 保護液：包含 20%乙醇的 1* PBS。
7. 含氨基的蛋白或者多(duō)肽：在 2~3 ml 偶聯液中溶解 1~20 mg 蛋白或 1~2 mg 多(duō)肽。對于已經在溶液
中的蛋白質，在耦聯液中稀釋 4 倍，或将脫鹽/透析稀釋到偶聯液中。徹底清除含有(yǒu)伯胺的緩沖液
（如 Tris 或甘氨酸）。
8. 封閉液：0.5 M 乙醇胺，0.5 M NaCl，pH 8.3 或 0.1 M Tris-HCl，pH 8.5。
抗原偶聯過程
颠倒混勻瓊脂糖凝膠幾次。
1、垂直放置含有(yǒu) NHS 活化樹(shù)脂的柱子，平衡柱至室溫，使樹(shù)脂沉降。用洗滌液通(tōng)過抽濾洗滌三次，再
用耦合緩沖液洗滌一次。
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2、添加溶解好的蛋白樣品到清洗完畢的 NHS 活化的瓊脂糖中（NHS 活化瓊脂糖 4 FF 體(tǐ)積：樣品溶液體(tǐ)積=1：1~2）。
3、混合震蕩反應在 28℃進行(xíng) 2~4 h，或者 4℃過夜。
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4、收集耦合樣品，以便檢測耦合效率。填料用去離子水(shuǐ)進行(xíng)洗滌。加入兩倍柱體(tǐ)積的封閉液于28℃震
蕩反應 1 h。
5、流幹封閉液并去除，加入三倍柱體(tǐ)積的去離子水(shuǐ)洗滌樹(shù)脂。樹(shù)脂洗滌分别通(tōng)過洗滌液 1、去離子水(shuǐ)、
洗滌液 2、去離子水(shuǐ)按順序重複洗滌兩次， 然後加入相同體(tǐ)積的保護緩沖液，于 2~8℃儲存。
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一． 買方對産品的使用：産品應當用于實驗室研究目的，不可(kě)用作(zuò)其他用途（包括但(dàn)不限于：體(tǐ)外診斷、食品、藥物、醫(yī)療器(qì)械、人(rén)用或獸用治療、化妝品或其他商業用途）。購買方應明(míng)确清楚知道(dào)此聲明(míng)，并嚴格遵守。如有(yǒu)任何因購買方隐瞞真實購買意圖，由此引起的法律責任以及一切法律後果，由購買方承擔。
二． 準确訂貨：下訂單時(shí)，買方應預先仔細審閱産品的技(jì)術(shù)指标，确認無誤。不詳之處應立即查詢。訂單及産品一經發出，即視(shì)為(wèi)買方認可(kě)有(yǒu)關産品的技(jì)術(shù)指标。
三． 質量責任：我司保證所供産品質量與随貨COA所列标準相符。買方應以産品制(zhì)造商的标準作(zuò)為(wèi)驗收标準。鑒于化學品的特殊性，賣方對未使用之前的産品質量負責，對化學品的應用不負有(yǒu)任何直接與間(jiān)接的責任。賣方提醒買方：在做(zuò)實驗之前，預先按照技(jì)術(shù)規範檢驗産品質量。在産品開(kāi)始使用之後，買方對應用及其結果負有(yǒu)全部責任。若有(yǒu)質量異議，買方需在收到貨物後10個(gè)工作(zuò)日內(nèi)書(shū)面通(tōng)知賣方，過期無效。
四． 有(yǒu)限保證：在适用法律允許的最大(dà)限度內(nèi)，賣方提供的産品均“按現狀條件”提供給買方，賣方不作(zuò)對産品和(hé)/或其使用的各種明(míng)示或默示的保證（包括但(dàn)不限于對适銷性、适合用于特殊用途及不侵權的所有(yǒu)明(míng)示或默示保證）或賣方産品會(huì)達到任何特定結果或不會(huì)被中斷或不會(huì)有(yǒu)錯誤的保證。
五． 責任限制(zhì)：在适用法律允許的最大(dà)限度內(nèi)，賣方不對以任何方式由本合同、賣方産品或使用賣方産品引起的或與此有(yǒu)關的任何利潤或收入損失或其他後果性損失、随附性損失、特殊損失、懲罰性損失或任何其他間(jiān)接損失或損害承擔責任。在适用法律允許的最大(dà)限度內(nèi)，賣方的最高(gāo)賠償限額為(wèi)買方就所涉及的賣方産品實際支付給賣方的價格。
六． 如賣方因不可(kě)抗拒力原因無法供貨，賣方将及時(shí)通(tōng)知買方，雙方将視(shì)情況決定部分不履行(xíng)、全部不履行(xíng)或延期履行(xíng)；如供貨期限屆滿日為(wèi)國內(nèi)外重大(dà)節日或國家(jiā)法定假日，則供貨期限順延；若因缺貨導緻延期交貨或無法供貨，賣方将及時(shí)告知買方，并不視(shì)為(wèi)賣方違約。不可(kě)抗力：因火(huǒ)災、洪水(shuǐ)、風暴、爆炸、恐怖事件、戰争、政府行(xíng)為(wèi)或任何其他賣方無法預見、無法避免和(hé)無法克服的事件造成延期交貨或無法交貨的，賣方不承擔任何責任。
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（2）常規試劑采用快遞，運費以顯示為(wèi)準。
（3）大(dà)物件一般默認發德邦物流，運費需聯系客服計(jì)算(suàn)。
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一． 買方對産品的使用：産品應當用于實驗室研究目的，不可(kě)用作(zuò)其他用途（包括但(dàn)不限于：體(tǐ)外診斷、食品、藥物、醫(yī)療器(qì)械、人(rén)用或獸用治療、化妝品或其他商業用途）。購買方應明(míng)确清楚知道(dào)此聲明(míng)，并嚴格遵守。如有(yǒu)任何因購買方隐瞞真實購買意圖，由此引起的法律責任以及一切法律後果，由購買方承擔。
二． 準确訂貨：下訂單時(shí)，買方應預先仔細審閱産品的技(jì)術(shù)指标，确認無誤。不詳之處應立即查詢。訂單及産品一經發出，即視(shì)為(wèi)買方認可(kě)有(yǒu)關産品的技(jì)術(shù)指标。
三． 質量責任：我司保證所供産品質量與随貨COA所列标準相符。買方應以産品制(zhì)造商的标準作(zuò)為(wèi)驗收标準。鑒于化學品的特殊性，賣方對未使用之前的産品質量負責，對化學品的應用不負有(yǒu)任何直接與間(jiān)接的責任。賣方提醒買方：在做(zuò)實驗之前，預先按照技(jì)術(shù)規範檢驗産品質量。在産品開(kāi)始使用之後，買方對應用及其結果負有(yǒu)全部責任。若有(yǒu)質量異議，買方需在收到貨物後10個(gè)工作(zuò)日內(nèi)書(shū)面通(tōng)知賣方，過期無效。
四． 有(yǒu)限保證：在适用法律允許的最大(dà)限度內(nèi)，賣方提供的産品均“按現狀條件”提供給買方，賣方不作(zuò)對産品和(hé)/或其使用的各種明(míng)示或默示的保證（包括但(dàn)不限于對适銷性、适合用于特殊用途及不侵權的所有(yǒu)明(míng)示或默示保證）或賣方産品會(huì)達到任何特定結果或不會(huì)被中斷或不會(huì)有(yǒu)錯誤的保證。
五． 責任限制(zhì)：在适用法律允許的最大(dà)限度內(nèi)，賣方不對以任何方式由本合同、賣方産品或使用賣方産品引起的或與此有(yǒu)關的任何利潤或收入損失或其他後果性損失、随附性損失、特殊損失、懲罰性損失或任何其他間(jiān)接損失或損害承擔責任。在适用法律允許的最大(dà)限度內(nèi)，賣方的最高(gāo)賠償限額為(wèi)買方就所涉及的賣方産品實際支付給賣方的價格。
六． 如賣方因不可(kě)抗拒力原因無法供貨，賣方将及時(shí)通(tōng)知買方，雙方将視(shì)情況決定部分不履行(xíng)、全部不履行(xíng)或延期履行(xíng)；如供貨期限屆滿日為(wèi)國內(nèi)外重大(dà)節日或國家(jiā)法定假日，則供貨期限順延；若因缺貨導緻延期交貨或無法供貨，賣方将及時(shí)告知買方，并不視(shì)為(wèi)賣方違約。不可(kě)抗力：因火(huǒ)災、洪水(shuǐ)、風暴、爆炸、恐怖事件、戰争、政府行(xíng)為(wèi)或任何其他賣方無法預見、無法避免和(hé)無法克服的事件造成延期交貨或無法交貨的，賣方不承擔任何責任。
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運輸：
（1）生(shēng)物試劑需要冷凍運輸，運輸需要泡沫盒和(hé)一定量的冰袋（特殊商品需要幹冰），運費金額會(huì)開(kāi)進發票(piào)裏。運費以顯示為(wèi)準
（2）常規試劑采用快遞，運費以顯示為(wèi)準。
（3）大(dà)物件一般默認發德邦物流，運費需聯系客服計(jì)算(suàn)。
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